Amidase (AMD)
Enzim:Adalah pemangkin biologi makromolekul, kebanyakan enzim adalah protein
Amidase:Memangkinkan hidrolisis pelbagai amida alifatik dan aromatik endogen dan asing dengan memindahkan kumpulan asil kepada air dengan penghasilan asid bebas dan ammonia.Asid hidroksamik dan asid organik lain digunakan secara meluas sebagai ubat kerana ia merupakan juzuk faktor pertumbuhan, antibiotik dan perencat tumor.Amidases boleh dibahagikan kepada acylases jenis R dan jenis S mengikut stereoselektiviti mangkin.
Selain memangkinkan hidrolisis amida, amidase juga boleh memangkinkan tindak balas pemindahan asil dengan kehadiran substrat bersama seperti hidroksilamin.
Amidase dengan sumber yang berbeza mempunyai kekhususan substrat yang berbeza, sesetengah daripada mereka hanya boleh menghidrolisis amida aromatik, sesetengah daripada mereka hanya boleh menghidrolisis amida alifatik, dan beberapa menghidrolisis amida α-atau ω-amino.Kebanyakan amina mempunyai aktiviti pemangkin yang baik hanya untuk amida aromatik asiklik atau ringkas, tetapi untuk aromatik kompleks, amida heterosiklik, terutamanya amida dengan substituen orto, secara amnya mempunyai aktiviti yang rendah (hanya beberapa enzim menunjukkan kesan pemangkin yang lebih baik).
Mekanisme pemangkin:
Enzim | Kod Produk | Kod Produk |
Serbuk Enzim | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | satu set 19 amidases, 50 mg setiap 19 item * 50mg / item, atau kuantiti lain |
Kit Saringan (SynKit) | ES-AMD-1900 | satu set 19 amidases, 1 mg setiap 19 item * 1mg / item |
★ Kekhususan substrat yang tinggi.
★ Selektif kiral yang kuat.
★ Kecekapan penukaran yang tinggi.
★ Kurang produk sampingan.
★ Keadaan tindak balas yang ringan.
★ mesra alam.
➢ Saringan enzim perlu dijalankan untuk substrat tertentu kerana kekhususan substrat, dan dapatkan enzim yang memangkinkan substrat sasaran dengan kesan pemangkin terbaik.
➢ Jangan sekali-kali bersentuhan dengan keadaan yang melampau seperti: suhu tinggi, pH tinggi/rendah dan pelarut organik dengan kepekatan tinggi.
➢ Biasanya, sistem tindak balas harus termasuk substrat, larutan penimbal (pH tindak balas optimum enzim).Substrat bersama seperti hidroksilamin harus ada dalam sistem tindak balas pemindahan asil.
➢ AMD hendaklah ditambah terakhir ke dalam sistem tindak balas dengan pH dan suhu tindak balas optimum.
➢ Semua jenis AMD mempunyai pelbagai keadaan tindak balas optimum, jadi setiap daripada mereka perlu dikaji lebih lanjut secara individu.
Contoh 1(1):
Aktiviti hidrolisis kepada Substrat Amida yang berbeza
Substrat | Aktiviti khusus μmol min-1mg-1 | Substrat | Aktiviti khusus μmol min-1mg-1 |
Acetamide | 3.8 | ο-OH benzamide | 1.4 |
Propionamide | 3.9 | p-OH benzamide | 1.2 |
Laktamid | 12.8 | ο-NH2benzamide | 1.0 |
Butyramide | 11.9 | p-NH2benzamide | 0.8 |
Isobutyramide | 26.2 | ο-Toluamide | 0.3 |
Pentanamide | 22.0 | p-Toluamide | 8.1 |
Heksanamida | 6.4 | Nikotinamide | 1.7 |
Sikloheksanamida | 19.5 | Isonicotinamide | 1.8 |
Akrilamida | 10.2 | Picolinamide | 2.1 |
Metakrilamida | 3.5 | 3-Phenylpropionamide | 7.6 |
Prolinamide | 3.4 | Indol-3-acetamide | 1.9 |
Benzamide | 6.8 |
Tindak balas dijalankan dalam larutan penimbal natrium fosfat 50mM, pH 7.5, pada 70 ℃.
Amida | Hidroksilamin | Hidrazin |
Acetamide | 8.4 | 1.4 |
Propionamide | 18.4 | 3.0 |
Isobutyramide | 25.0 | 22.7 |
Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Tindak balas dijalankan dalam larutan penimbal natrium fosfat 50mM, pH 7.5, pada 70 ℃.
Kepekatan reagen berkaitan: amida, 100 mM(benzamide, 10 mM);hidroksilamin dan hidrazin, 400 mM;enzim 0.9 μM.
Contoh 2(2):
Contoh 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al.Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, et al.Biokimia Proses, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, et al.Kimia Bioorganik, 2017, Tersedia dalam talian 7.