Amidase (AMD)
Enzim:Merupakan pemangkin biologi makromolekul, kebanyakan enzim adalah protein
Amidase:Memangkinkan hidrolisis pelbagai amida alifatik dan aromatik endogen dan asing dengan memindahkan kumpulan asil ke dalam air dengan penghasilan asid bebas dan ammonia. Asid hidroksamik dan asid organik lain digunakan secara meluas sebagai ubat kerana ia merupakan juzuk faktor pertumbuhan, antibiotik dan perencat tumor. Amidase boleh dibahagikan kepada asilase jenis R dan jenis S mengikut stereoselektiviti pemangkin.
Selain memangkinkan hidrolisis amida, amidase juga boleh memangkinkan tindak balas pemindahan asil dengan kehadiran ko-substrat seperti hidroksilamine.
Amidase dengan sumber yang berbeza mempunyai kekhususan substrat yang berbeza, sesetengahnya hanya boleh menghidrolisis amida aromatik, sesetengahnya hanya boleh menghidrolisis amida alifatik, dan sesetengahnya menghidrolisis amida α-atau ω-amino. Kebanyakan amina mempunyai aktiviti pemangkin yang baik hanya untuk amida aromatik asiklik atau ringkas, tetapi untuk aromatik kompleks, amida heterosiklik, terutamanya amida dengan substituen orto, secara amnya rendah aktiviti (hanya beberapa enzim yang menunjukkan kesan pemangkin yang lebih baik).
Mekanisme pemangkin:
| Enzim | Kod Produk | Kod Produk |
| Serbuk Enzim | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | satu set 19 amidase, 50 mg setiap satu 19 item * 50mg / item, atau kuantiti lain |
| Kit Saringan (SynKit) | ES-AMD-1900 | satu set 19 amidase, 1 mg setiap satu 19 item * 1mg / item |
★ Kekhususan substrat yang tinggi.
★ Selektiviti kiral yang kuat.
★ Kecekapan penukaran yang tinggi.
★ Kurang hasil sampingan.
★ Keadaan tindak balas yang ringan.
★ Mesra alam sekitar.
➢ Saringan enzim perlu dijalankan untuk substrat tertentu kerana kekhususan substrat tersebut, dan mendapatkan enzim yang memangkinkan substrat sasaran dengan kesan pemangkinan terbaik.
➢ Jangan sekali-kali bersentuhan dengan keadaan ekstrem seperti: suhu tinggi, pH tinggi/rendah dan pelarut organik berkepekatan tinggi.
➢ Biasanya, sistem tindak balas harus merangkumi substrat, larutan penimbal (pH tindak balas optimum enzim). Ko-substrat seperti hidroksilamine harus ada dalam sistem tindak balas pemindahan asil.
➢ AMD perlu ditambah terakhir ke dalam sistem tindak balas dengan pH dan suhu tindak balas optimum.
➢ Semua jenis AMD mempunyai pelbagai keadaan tindak balas optimum, jadi setiap satunya perlu dikaji lebih lanjut secara individu.
Contoh 1(1):
Aktiviti hidrolisis kepada Substrat Amida yang berbeza
| Substrat | Aktiviti khusus μmol min-1mg-1 | Substrat | Aktiviti khusus μmol min-1mg-1 |
| Asetamida | 3.8 | ο-OH benzamida | 1.4 |
| Propionamida | 3.9 | p-OH benzamida | 1.2 |
| Laktamida | 12.8 | ο-NH2benzamida | 1.0 |
| Butiramid | 11.9 | p-NH2benzamida | 0.8 |
| Isobutiramida | 26.2 | ο-Toluamida | 0.3 |
| Pentanamida | 22.0 | p-Toluamida | 8.1 |
| Heksanamida | 6.4 | Nikotinamida | 1.7 |
| Sikloheksanamida | 19.5 | Isonikotinamida | 1.8 |
| Akrilamida | 10.2 | Pikolinamida | 2.1 |
| Metakrilamida | 3.5 | 3-Fenilpropionamida | 7.6 |
| Prolinamida | 3.4 | Indol-3-asetamida | 1.9 |
| Benzamide | 6.8 |
Tindak balas telah dijalankan dalam larutan penimbal natrium fosfat 50mM, pH 7.5, pada 70 ℃.
| Amida | Hidroksilamina | Hidrazina |
| Asetamida | 8.4 | 1.4 |
| Propionamida | 18.4 | 3.0 |
| Isobutiramida | 25.0 | 22.7 |
| Benzamide | 9.2 | 6.1 |
Tindak balas telah dijalankan dalam larutan penimbal natrium fosfat 50mM, pH 7.5, pada 70 ℃.
Kepekatan reagen berkaitan: amida, 100 mM (benzamida, 10 mM); hidroksilamina dan hidrazina, 400 mM; enzim 0.9 μM.
Contoh 2(2):
Contoh 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S., et al. Extremophiles, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR, dkk. Biokimia Proses, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM, dkk. Kimia Bioorganik, 2017, Boleh didapati dalam talian 7.
